Una de las primeras exploraciones de los conquistadores en el Norte Argentino fueron emprendidas por Francisco de Mendoza y Nicolás de Heredia en 1545,  atravesaron las sierras con dirección al oriente en la esperanza de descubrir riquezas minerales y huacas. Por el valle de Calamuchita (sierra de Córdoba) descendieron a las márgenes del Río Tercero, y se cuenta que llegaron hasta la Torre de Gabotto, donde encontraron una cruz y el letrero "cartas al pie" que les dieron noticias de Irala y de la situación del Paraguay. Quien lo cuenta es Rui Díaz de Guzmán. Lo singular es que allí riñeron a muerte unos con otros; probablemente por distintos pareceres de lo que habían de hacer. Nicolás de Heredia mató a puñaladas a Mendoza y a Sancho Hinojosa. El resto tomó otra vez el camino del Perú por las tierras bajas y selvas de Tarija y llegaron a Chuquisaca en los momentos de otra y más violenta agitación.

En 1563 fue creada la Gobernación del Tucumán bajo la jurisdicción del Virreinato del Perú para dirigir la política y la administración. la Real Audiencia de Charcas abarcaba el área judicial.

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